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Fuentes importantes de biotina son el hígado, laboratorio multivitamínico de la naturaleza, carne, levadura, yema del huevo, leche, hongos y vegetales. La D-biotina seca, en forma de cristales es claramente estable al aire, luz de día y calor; es gradualmente destruida por la radiación UV.

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El método microbiológico es el método de elección para la biotina. La biotina debe extraerse en la forma libre de la muestra antes del ensayo. Luego el extracto es centrifugado, filtrado y se utiliza la solución transparente para el ensayo microbiológico.

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Por lo tanto, en este momento se recomienda un método microbiológico para la determinación de la actividad de la vitamina B 6. Después de la hidrólisis, las soluciones son neutralizadas a un pH 5,0 con una solución de hidróxido de sodio. El medio de cultivo no.

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La turbidez de la suspensión celular se mide a mn después de mezclar bien. La vitamina B 12 se encuentra sólo en material de origen animal y en los metabolitos de microorganismos. Las fuentes importantes de B 12 son el hígado, riñón y yema de huevo.

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En almacenamiento en frío y protegidos de la humedad, el D-pantotenato de calcio y el D-pantotenato de sodio son claramente estables al oxígeno atmosférico y a la luz. Los compuestos son higroscópicos, particularmente la sal sódica.

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Si el material contiene grandes cantidades de grasa, es recomendable remover los lípidos. Esto se realiza agregando al agua, por ejemplo 20 ml de acetato de etilo. Se utiliza la capa acuosa para el procedimiento posterior.

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El extracto acuoso es diluido a un volumen definido con agua y se filtra. El pH de la solución filtrada se ajusta a 6,8 con hidróxido de sodio y se ajusta a un volumen definido.

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Esta solución es utilizada para el ensayo micro-biológico. Se realiza una segunda transferencia del cultivo utilizando 6 ml del medio e inoculando con 0,1 ml del primer cultivo.

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Los tubos son llenados con el caldo de ensayo Difco; medio de ensayo de pantotenato no. La biotina se encuentra parcialmente en estado libre en vegetales, frutas, leche, salvado de arroz y parcialmente en forma unida a proteína en tejidos animales, semillas de plantas, levaduras.

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Los métodos discutidos se aplican actualmente en la determinación de la vitaminas por muchos laboratorios. Algunos de los antiguos procedimientos no laboratorio multivitamínico de la naturaleza tratados en forma extensa dado que no satisfacen los requerimientos actuales en relación a exactitud, precisión y selectividad.

Por lo tanto, debería evitarse la luz solar directa y la luz brillante.

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La vitamina A se utiliza como un nombre genérico para describir al retinol, sus ésteres y los correspondientes isómeros. La vitamina A se encuentra principalmente en productos animales tales como leche, crema, mantequilla, queso, huevos, carne, hígado, riñón y aceite de hígado de bacalao.

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Los alimentos son fortificados normalmente con ésteres de retinol tales como acetato, palmitato o propionato utilizando formulaciones especiales que mejoran la estabilidad. Palmitato de retinol: Polvo cristalino amarillo o aceite amarillo P.

Primeramente, se determinaba la vitamina A mediante una reacción colorimétrica de retinol con tricloruro de antimonio reacción de Carr-Price. El retinol obtenido después de saponificar y extraer los componentes no saponificables tenía que ser purificado utilizando cromatografía de columna abierta con el fin de eliminar los componentes interferentes. laboratorio multivitamínico de la naturaleza

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Una comparación de los métodos basada en los datos obtenidos en un estudio colaborativo 6 revela que las condiciones para la saponificación pueden variar dentro de ciertos límites sin afectar los resultados. Los antioxidantes deberían ser agregados a la muestra antes de la adición de la solución de hidróxido de potasio.

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El Cuadro 1 muestra un ejemplo de la proporción de estos reactivos. Cuadro 1 Proporción de reactivos para saponificación.

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Los extractos combinados son lavados a pH neutro con agua veces, m1. El residuo es redisuelto utilizando de preferencia la fase móvil u otro solvente compatible con HPLC de tal modo de obtener una concentración apropiada para la inyección dentro de la columna de HPLC.

Esta la solución final de la muestra.

Principalmente, pueden utilizarse dos modos de cromatografía fase normal y fase reversa para la cuantificación de la vitamina A. Es importante indicar claramente las unidades utilizadas para informar los resultados.

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Cuadro 2 Condiciones de los sistemas de cromatografía para vitamina A. La vitamina E que se encuentra en la laboratorio multivitamínico de la naturaleza abarca una serie de compuestos denominados tocoferoles y tocotrienoles. Estos compuestos tienen diferentes actividades biológicas y por lo tanto es importante que sean cuantificados individualmente si ha de determinarse la actividad biológica de la vitamina E.

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La vitamina E también se encuentra laboratorio multivitamínico de la naturaleza los vegetales con hojas lechuga, espinaca, repollo, puerroen la grasa animal y también en la leche, mantequilla y queso.

El método anteriormente utilizado para la determinación de la vitamina E en los alimentos era una reacción de cloruro férrico que se reducía a iones ferrosos, los que forman un complejo de color rojo con ajaMipiridina, o batofenantrolina 4,7-difenil-1,fenantrolina.

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Se agrega n-hexano u otro solvente apropiado y se disuelve con agitación. La sonicación de la solución puede apoyar el proceso de disolución.

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El volumen es completado hasta el aforo con el mismo solvente. La margarina o mantequilla se tratan de una manera similar. Es necesario separar la grasa de estas muestras antes de la etapa de dilución.

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Esto puede realizarse por ejemplo: mezclando la muestra con sulfato de sodio anhidro, agregando n-hexano y, tratando la mezcla en un baño ultrasónico. Los sólidos son filtrados y lavados extensamente con n-hexano. Los tocoferoles son muy sensibles al oxígeno en un ambiente alcalino. Por lo tanto, el alcohol y el antioxidante deberían agregarse a la laboratorio multivitamínico de la naturaleza antes de la adición de la solución de hidróxido de potasio necesario para la saponificación y tiene que tenerse cuidado en remover todo el oxígeno del recipiente de reacción.

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A continuación se muestra un ejemplo de la proporción de estos reactivos. Cuadro 3.

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Cuadro 3 Proporción de reactivos para saponificación. Los extractos combinados son lavados a pH neutro con agua veces, ml. Deben tomarse medidas para remover restos de agua tales como secar con sulfato de sodio, o destilación azeotrópica con etanol o tolueno o el uso de papel filtro para separación de fases. laboratorio multivitamínico de la naturaleza

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Principalmente, pueden utilizarse dos modos de cromatografía fase normal y fase reversa para la cuantificación de los tocoferoles. La detección se realiza preferentemente mediante fluorescencia debido a su mayor selectividad así como también por los menores límites de detección obtenidos si se compara con UV.

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Cuadro 4 Condiciones de los sistemas de cromatografía para tocoferoles. Sistema de fase reversa FR Columna. La vitamina D 2 se encuentra en pequeñas cantidades en los aceites de hígado de pescado y algunas esponjas.

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Por lo tanto, deben almacenarse bajo nitrógeno en frascos sellados. Los compuestos cristalinos son relativamente estables al calor, pero tienden a isomerizarse en solución.

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La vitamina D 2 y la vitamina D 3 son extraídas de los alimentos mediante saponificación utilizando una solución alcohólica de hidróxido de potasio seguida de una extracción del solvente.

La determinación de vitamina D 2 y D laboratorio multivitamínico de la naturaleza en una solución apropiada del extracto de la muestra se realiza mediante HPLC de fase normal semipreparativa seguida por HPLC de fase reversa analítica.

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El antioxidante debería agregarse a la muestra antes de la adición de la solución de hidróxido de potasio necesaria para la saponificación. En el Cuadro 5, se muestran ejemplos de la proporción de reactivos utilizados para la saponificación.

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Cuadro 5 Proporción de reactivos para saponificación. El residuo es redisuelto utilizando de preferencia la fase móvil del sistema HPLC semipreparativo u otro solvente compatible con HPLC de tal modo de obtener una concentración apropiada para la inyección dentro de la columna de HPLC.

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Esto permite una recolección precisa de la banda de la fracción de vitamina D. Una alícuota del extracto de la muestra concentrada se inyecta en el sistema HPLC semipreparativo y la fracción de la vitamina D es recogida vía corte de bandas.

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La fracción del corte de banda obtenida en la HPLC semipreparativa debe llevarse a sequedad y redisolverse en un solvente compatible con la fase móvil del sistema analítico de HPLC analítico.

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Cuadro 6 Condiciones de los sistemas de cromatografía para vitamina D. En el grupo de la vitamina Kj la cadena lateral tiene sólo un enlace doble, mientras que en el otro grupo de la vitamina K 3los laboratorio multivitamínico de la naturaleza enlaces de la vitamina K 3 se repiten regularmente en la cadena lateral.

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Los métodos desarrollados en años recientes para la determinación de la vitamina K 1 se basan principalmente en procedimientos HPLC.

Los problemas relacionados a la cuantificación son similares a aquellos de la vitamina D 3 : bajas concentraciones e interferencias con las matrices de los alimentos. Dado que la vitamina K 1 no es estable bajo condiciones alcalinas, el material lipídico por lo general presente en fórmulas infantiles y leche en polvo es removido por laboratorio multivitamínico de la naturaleza digestión con lipasa.

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Cuadro 7. Cuadro 7 Condiciones de los sistemas de cromatografía para vitamina K.

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Las vitaminas del grupo B presentan buena solubilidad al agua y por lo tanto, no es sorprendente que se haya desarrollado métodos principalmente microbiológicos para la determinación de estos compuestos. Los métodos microbiológicos tienen claras ventajas como por ejemplo, son capaces de medir cantidades muy pequeñas de una vitamina en particular en un amplio rango laboratorio multivitamínico de la naturaleza matrices y con una precisión razonable.

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Se agrega cloruro de sodio después de la oxidación para optimizar la extracción. Después de la centrifugación se toman 10 ml del extracto de isobutanol, se mezcla con 0,5 ml de etanol y se mide la fluorescencia en contra del blanco.

Es importante seguir exactamente el protocolo para obtener resultados reproducibles. El tiocromo formado como se describió en el procedimiento anterior puede también cuantifícarse utilizando HPLC.

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La cuantifícación de la tiamina también puede lograrse utilizando un sistema HPLC de fase reversa que separa en gran medida la tiamina de los otros componentes. En una etapa de derivatización postcolumna se realiza la oxidación a tiocromo mezclando el eluente con la solución de ferricianato alcalino seguida por detección fluorescente La riboflavina se encuentra en los alimentos como riboflavina libre o como riboflavina-5'-fosfato FMN y como flavin adenina laboratorio multivitamínico de la naturaleza FAD.

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Las principales fuentes de vitamina B 2 son hígado, riñón, carne, pescado, leche, queso, huevos y vegetales. Ambos compuestos son sensibles a la luz y a la radiación UV, pero son estables al calor y al oxígeno atmosférico.

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Debido a sus propiedades físico-químicas, la riboflavina puede determinarse fluorométricamente. Se han utilizado diferentes métodos en el pasado que incluyen la irradiación de un extracto de muestra purificada con luz lo que lleva a la formación del llamado lumicromo.

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Sin embargo, el procedimiento de trabajo requiere tiempo y trabajo. Micción frecuente y dolor en el pene no uti o estándar. Necesidad frecuente de orinar después de defecar.

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